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目的 观察供心过表达微小RNA-499 (miR-499)对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用聚合酶链反应(PCR)行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠(WT)和同系(C57BL/6背景)miR-499转基因小鼠(Tg)来源的供心,均置于4℃生理盐水中保存16h,检测保存液中心肌酶谱:肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.实验分为WT供心组和Tg供心组,建立同系小鼠腹部异位心脏移植模型,通过视诊和触诊观察不同小鼠供心经过冷保存,移植给相同受体后心功能的恢复,并于移植后24h获取供心,行苏木素-伊红(HE)染色,观察移植心脏组织病理学改变.结果 PCR结果显示miR-499转基因小鼠能检测到miR-499基因及相关载体片段,在图中呈现阳性条带;WT小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为(5 043.0±523.8) U/L和(1 068.0±150.0)U/L,Tg小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为(3 667.0±194.7) U/L和(684.0±19.1) U/L,Tg小鼠心脏在冷缺血过程中,两种心肌酶谱的释放值均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).移植后相同时间点观测结果显示,WT小鼠来源心脏的临床功能评分明显低于Tg小鼠,15 min时的平均评分分别为0.9分和2.3分,24 h的平均评分分别为2.1分和3.4分(P<0.05).移植后24 h,WT小鼠来源供心有大量炎性细胞浸润并伴有心肌细胞坏

作者:张玄;黄霞;栾宙;王平良;陈知水;杨军

来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 10期

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作者:
张玄;黄霞;栾宙;王平良;陈知水;杨军
来源:
中华实验外科杂志 2014 年 31卷 10期
标签:
微小RNA-499 缺血再灌注损伤 心脏移植 MicroRNA 499 Ischemia-reperfusion injury Heart transplantation
目的 观察供心过表达微小RNA-499 (miR-499)对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用聚合酶链反应(PCR)行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠(WT)和同系(C57BL/6背景)miR-499转基因小鼠(Tg)来源的供心,均置于4℃生理盐水中保存16h,检测保存液中心肌酶谱:肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.实验分为WT供心组和Tg供心组,建立同系小鼠腹部异位心脏移植模型,通过视诊和触诊观察不同小鼠供心经过冷保存,移植给相同受体后心功能的恢复,并于移植后24h获取供心,行苏木素-伊红(HE)染色,观察移植心脏组织病理学改变.结果 PCR结果显示miR-499转基因小鼠能检测到miR-499基因及相关载体片段,在图中呈现阳性条带;WT小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为(5 043.0±523.8) U/L和(1 068.0±150.0)U/L,Tg小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为(3 667.0±194.7) U/L和(684.0±19.1) U/L,Tg小鼠心脏在冷缺血过程中,两种心肌酶谱的释放值均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).移植后相同时间点观测结果显示,WT小鼠来源心脏的临床功能评分明显低于Tg小鼠,15 min时的平均评分分别为0.9分和2.3分,24 h的平均评分分别为2.1分和3.4分(P<0.05).移植后24 h,WT小鼠来源供心有大量炎性细胞浸润并伴有心肌细胞坏