目的 观察微小RNA-101(miR-101)通过靶向抑制果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对人前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响.方法 应用miR-101模拟物转染PC-3细胞;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测转染后miR-101和EZH2的表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期;膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)双染色法测量细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭力.结果 miR-101在PC-3细胞中的表达明显低于RWPE-1细胞,EZH2 mRNA和蛋白在PC-3细胞中的表达显著高于RWPE-1细胞,miR-101的表达量与EZH2表达量呈负相关(P<0.05).miR-101模拟物转染PC-3细胞后,细胞中的miR-101表达上调(P<0.05),而EZH2 mRNA和蛋白表达水平也明显降低(P<0.05).MTT法显示:转染后48、72、96 h miR-101模拟物转染组细胞增殖明显低于两个对照组(P<0.05);流式细胞仪测定结果显示:转染后48 h,miR-101组发生了G0/G1期阻滞(P<0.05);细胞凋亡率检测结果显示:空白对照组、阴性对照组及miR-101模拟物转染组PC-3细胞凋亡率分别为(2.53±0.36)%、(2.71±0.42)%、(9.84±0.83)%,转染组凋亡率明显高于两个对照组(P<0.01).划痕实验显示:miR-101模拟物转染组细胞迁移能力明显
作者:丁翔;崔凤梅;徐松涛;陆兵;王臻帆;侯建全;严春寅
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 10期