目的 观察恒河猴轮状病毒(RRV)对BALB/c小鼠肝脏内调节性T(Treg)细胞的抑制作用是否与Treg细胞叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)基因启动子CpG岛甲基化有关,探讨其在小鼠肝脏自身免疫炎症中的作用.方法 60只7～9周龄BALB/c小鼠随机分为3组(每组20只)腹腔注射空斑形成单位(PFU)=106 RRV感染24h和48 h,正常对照组腹腔注射相同容积生理盐水,Percoll非连续梯度分离单核细胞,利用流式细胞仪分选小鼠肝脏CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞.应用重亚硫酸盐修饰后测序法(BSP)检测BALB/c小鼠脾脏组织中分选出的Treg细胞DNA Foxp3基因启动子CpG岛甲基化状态,Western blot检测Foxp3蛋白的表达.结果 Treg细胞在正常对照组和RRV24、48 h占CD4+细胞比例分别为(5.26±0.21)％、(4.30±0.46)％、(3.60±0.19)％,RRV24、48 h的比例与正常对照组细胞比例差异有统计学意义(P＜0.05);对照组和RRV组24、48 hCpG岛甲基化程度分别为(2.78±0.33)％、(26.70±1.87)％、(41.18±3.67)％,各时间点甲基化率均较正常组明显升高(P＜0.01),Treg细胞Foxp3蛋白表达也明显下降,与RRV感染的时间呈正相关,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 RRV可以明显促进BALB/c小鼠肝脏中Treg细胞Foxp3基因启动子CpG岛甲基化抑制Treg细胞的增殖和正常的免疫功能

作者：王新星；李康；李帅；雷海燕；张茜；熊梦；阳历；汤绍涛

来源：中华实验外科杂志 2015 年 32卷 6期