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目的 观察人参皂苷Rb1(GRb1)对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法 取3~5d无特定病原体(SPF)级SD大鼠20只,雌雄不限,体质量25~30 g,分离双侧坐骨神经行SCs体外培养,培养细胞经S-100免疫荧光染色标记鉴定.取对数生长期SCs加入GRb1培养24 h,调整GRb1的终质量浓度为10 mg/L(B组)、20 mg/L(C组)、50 mg/L(D组)、100 mg/L(E组)、500 mg/L(F组),对照组(A组)加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).细胞增殖检测法[细胞计数试剂盒(CCK-8)法]检测细胞增殖活性,碘化丙锭(PI)染色流式细胞仪检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测SCs内PCNA基因与蛋白的表达.结果 SCs经S-100免疫荧光标记染色提示阳性细胞率达90%以上,CCK-8检测结果显示GRb1在10~ 500 mg/L浓度范围内可以促进SCs增殖,流式细胞仪检测结果显示GRb1在10 ~500 mg/L浓度范围内可以促进SCs细胞周期进程,Real-time PCR及Western blot检测结果显示GRb1处理组SCs内PCNA基因和蛋白表达均高于对照组(P<0.05).结论 GRb1可以促进SCs增殖及细胞周期进程,并促进SCs内PCNA表达.

作者:陶海鹰;贺斌;卫爱林;陶凤华;李孝海;刘康

来源:中华实验外科杂志 2015 年 32卷 11期

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作者:
陶海鹰;贺斌;卫爱林;陶凤华;李孝海;刘康
来源:
中华实验外科杂志 2015 年 32卷 11期
标签:
人参皂苷Rb1 雪旺细胞 增殖 细胞周期 增殖细胞核抗原 Ginsenoside Rb1 Schwann cell Proliferation Cell cycle Proliferating cell nuclear antigen
目的 观察人参皂苷Rb1(GRb1)对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法 取3~5d无特定病原体(SPF)级SD大鼠20只,雌雄不限,体质量25~30 g,分离双侧坐骨神经行SCs体外培养,培养细胞经S-100免疫荧光染色标记鉴定.取对数生长期SCs加入GRb1培养24 h,调整GRb1的终质量浓度为10 mg/L(B组)、20 mg/L(C组)、50 mg/L(D组)、100 mg/L(E组)、500 mg/L(F组),对照组(A组)加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).细胞增殖检测法[细胞计数试剂盒(CCK-8)法]检测细胞增殖活性,碘化丙锭(PI)染色流式细胞仪检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测SCs内PCNA基因与蛋白的表达.结果 SCs经S-100免疫荧光标记染色提示阳性细胞率达90%以上,CCK-8检测结果显示GRb1在10~ 500 mg/L浓度范围内可以促进SCs增殖,流式细胞仪检测结果显示GRb1在10 ~500 mg/L浓度范围内可以促进SCs细胞周期进程,Real-time PCR及Western blot检测结果显示GRb1处理组SCs内PCNA基因和蛋白表达均高于对照组(P<0.05).结论 GRb1可以促进SCs增殖及细胞周期进程,并促进SCs内PCNA表达.