目的 探讨自噬基因Beclin-1表达沉默对A549肺癌细胞自噬和凋亡的影响以及其作用机制.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot的方法分别检测转染后各组A549肺癌细胞Beclin-1 mRNA和蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)法检测各组A549细胞生长增殖;单丹磺酰戊二胺(MDC)法检测各组A549细胞自噬的变化;用流式细胞仪检测各组A549细胞凋亡;Western blot方法检测各组A549细胞食管癌相关基因4(EC RG4)蛋白表达变化.结果 与对照组比较,感染Beclin-1小干扰RNA (siRNA)慢病毒颗粒后,A549细胞中Beclin-1 mRNA和蛋白表达显著减少(P＜0.05),Beclin-1 mRNA的沉默效率分别为35.56％、89.22％和66.78％;感染Beclin-1siRNA慢病毒颗粒后,A549细胞凋亡率为(4.31±0.49)％,和对照组比较显著降低(P＜0.05);感染Beclin-1 siRNA慢病毒颗粒后,A549细胞群体平均倍增时间为(37.7±2.6)h,和对照组比较,平均倍增时间缩短(P＞0.05);感染Beclin-1 siRNA慢病毒颗粒后,和对照组比较,A549细胞自噬细胞阳性数量减少(P＞0.05);感染Beclin-1 siRNA慢病毒颗粒后,和对照组比较,ECRG4蛋白表达下降(P＜0.05).结论 自噬基因Beclin-1通过ECRG4通路影响A549肺癌细胞自噬和凋亡.

作者：王文玉；樊红琨；李晓燕；伍钢；赵国强；李林蔚

来源：中华实验外科杂志 2016 年 33卷 3期