目的 观察Toll样受体4(TLR4)在高糖加重缺氧性肾小管上皮细胞损伤中的作用.方法 构建小鼠TLR4-短发夹RNA(TLR4 shRNA)慢病毒载体并包装慢病毒,大鼠肾小管上皮细胞RPTC经低糖(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖(30 mmol/L葡萄糖)、甘露醇(5.5 mmol/L葡萄糖±24.5 mmol/L甘露醇)培养基处理后,分别使用TLR4 shRNA或空白对照shRNA慢病毒感染RPTC细胞,使用叠氮钠诱导RPTC细胞发生凋亡,采用Western blot法检测TLR4蛋白的表达;细胞核染色检测细胞凋亡变化.结果 TLR4shRNA慢病毒载体构建并包装成功,高糖组RPTC细胞TLR4蛋白表达水平较低糖组、甘露醇组显著升高(P＜0.05),高糖组RPTC细胞叠氮钠诱导凋亡水平[(65.4±8.1)％]较低糖组[(20.5±9.9)％]、甘露醇组[(18.5±7.3)％]显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).TLR4shRNA可显著降低高糖组RPTC细胞TLR4蛋白水平,并可使高糖组RPTC细胞凋亡水平由(68.5±9.3)％降至(30.2±7.8)％(P＜0.05).结论 高糖可激活TLR4信号通路,并可显著增加缺氧性肾小管上皮细胞损伤,下调TLR4表达能降低肾小管上皮细胞缺氧性损伤的敏感性,提示高糖加重缺氧性肾小管损伤的作用机制可能是通过TLR4信号通路实现的.
作者：彭建平；郑航；王霞；程志祥；王行环
来源：中华实验外科杂志 2016 年 33卷 10期
