目的 观察Notch信号通路的特异性阻断剂——γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对毛囊干细胞(rHFSCs)诱导分化为血管内皮细胞(ECs)效率的影响.方法 运用改良的rHFSCs分离培养、纯化鉴定的方法得到种子细胞,并用透射电镜观察其内部结构.用10μg/L血管内皮生长因子165(VEGF165)作为诱导因子进行诱导,流式细胞仪检测分化效率.用不同浓度DAPT(0.5、1.0μmol/L)进行抑制,将他们分为诱导组和抑制组.两组细胞均处理1周,用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot法分别检测两组 CD31、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin) mRNA和蛋白表达,联合DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)吞噬功能检测和体外成血管实验形成实验进行对比,综合评价DAPT在抑制Notch信号通路后对rHFSCs诱导分化为ECs的影响.结果 改良分离、培养、纯化的rHFSCs克隆能力好,活力强.流式细胞仪检测β1、α6整合素、细胞角蛋白15(CK15)、p63呈高表达,分别为98.9
作者:杜伟斌;全仁夫;郑宣;李强;曹国平;庄伟;邵荣学;杨迪生
来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 6期