目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-143下调Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)在抑制食管癌侵袭转移中的作用机制.方法 体外培养食管癌细胞株EC109-H、TE-1及食管正常上皮细胞株Het-1A并随机分为实验组(EC109-H、TE-1)和阴性对照组(Het-1A);采用Transwell迁移实验、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法检测各组细胞的侵袭能力,miR-143及Wnt/β-catenin调控因子Wnt、β-catenin、CD44的表达量,并进行miR-143与Wnt/β-catenin通路调控蛋白的相关性分析;通过在线软件预测miR-143的相关靶点;利用miRNA抑制物及相似物改变细胞中miR-143含量,并构建CD44-3'端非编码区(3'UTR)载体及CD44-3'端非编码区(突变型)(3'UTRM)载体,应用双荧光素酶实验验证预测靶点.结果 各组细胞株侵袭能力比较,EC109-H的侵袭能力最强(156.86±0.83,P=0.003);miR-143在EC109-H中的表达量最低(1.01±0.12,P=0.000);高侵袭能力的EC109-H细胞株中Wnt、β-catenin、CD44表达量均高于其他组(0.51±0.11,P=0.005;0.65±0.12,P=0.007;0.80±0.09,P=0.001),且miR-143与上述蛋白表达均呈负相关(rCD44=-0.827,P=0.000;rwnt=-0.907,P=0.017;rβ-catenin=-0.810,P=0.028);靶点预测CD44可能为miR-143的调控靶点,双荧光素酶实验结果显示miR-143

作者：闫焱；张弛；李冰；刘霞；周昆

来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 6期