目的 观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)在结直肠癌中的表达及其短发夹RNA(shRNA)对结直肠癌细胞凋亡的影响.方法 Western blot检测结直肠癌组织和对应的癌旁组织中Foxp3的表达水平.同时Western blot检测人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO及人肠黏膜细胞CCC-HIE-2中Foxp3的表达水平.转染靶向Foxp3基因的shRNA的表达载体Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2和对照序列载体shRNA control至人结直肠癌细胞中,分别命名为Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2、shRNA control组.同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂.Western blot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Foxp3水平,筛选出干扰效率较高的shRNA.流式细胞术检测48h细胞凋亡.结果 Foxp3在癌旁组织及结肠癌组织中表达水平依次为:0.24±0.05、0.78±0.08,差异有统计学意义(t=63.254,P=0.000).Foxp3在人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO中的表达水平均高于人肠黏膜细胞CCC-HIE-2,且Foxp3的表达水平由低到高依次为:RKO、HCT116、SW480,后期选用SW480继续研究.未转染组、shRNA control、Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2 组细胞中Foxp3蛋白表达水平依次为:0.92±0.05、0.93±0.07、0.21±0.04、0.34±0.06,mRNA 表达水平依次为:1.00±0.07、1.01±0.08、0.53±0.06、0.79

作者：张勇超；谢建国；王家祥；韩广森；张永磊；张金岱

来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 8期