目的 筛选靶向抑制大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)基因表达最有效的短发夹RNA(shRNA),为基因沉默IGFBP-3治疗大鼠勃起功能障碍提供依据.方法 构建4对靶向IGFBP-3的短发夹RNA(shRNA)质粒和阴性对照,体外原代培养CCSMC,分6组:空白对照组、转染pGPU6/GFP/Neo-IGFBP-3 (611)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (526)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (866)组、转染pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP-3 (710)组和转染pGPU6/GFP/Neo-shNC阴性对照组;转染48h后各组分别用实时定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot方法检测靶向沉默IGFBP-3的效果.结果 CCSMC转染后实时定量PCR和Western blot检测发现,pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-526、pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-611、pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-866均有明显的沉默效果,与空白对照组和转染pGPU6/GFP/Neo-shNC组比较差异有统计学意义,而其中pGPU6/GFP/Neo-shIGFBP3-526沉默效果最明显,实时定量PCR和Western blot结果显示分别可以抑制72
作者：蒲小勇；周香雪；肖恒军；林楚琪；彭伟华；毕学成；李东；刘久敏
来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 8期
