目的 观察微小RNA-200c(miR-200c)对膀胱癌细胞T24增殖和细胞周期的影响并探讨其机制.方法 运用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测膀胱癌5个细胞株中miR-200c的表达水平.借助细胞转染技术,将miR-200c模拟物(mimics)及无义对照序列转染处于对数生长期的膀胱癌T24细胞,分别构建miR-200c过表达(MU组)及阴性对照组(NC组),并通过Real-time PCR技术进行验证转染效率.用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞转染24、48及72 h的细胞增殖率,流式细胞术观察细胞周期分布变化,Western blot法检测细胞周期相关蛋白表达水平的变化.结果 (1) miR-200c在膀胱癌细胞株EJ(13.204 ±0.946)、T24(18.259 ±0.776)、253J(8.333±0.543)、5637(6.594±0.326)、RT4(11.348 ±0.513)中表达量均显著高于正常尿路上皮细胞SV-Huc(1.053±0.078),差异有统计学意义(P=0.000).(2)MU组在转染miR-200c mimics 48、72 h后吸光度值(1.485±0.131、2.396±0.110)均显著高于NC组(1.158±0.182、1.893±0.216),差异有统计学意义(P =0.050、0.023).(3)与NC组比较,MU组细胞周期分布G1期比例下降[(54.65 ±0.60)%比(64.51±0.63)%,P=0.004],S期比例上升[(31.43±0.77)%比(27.99±0.53)%,P=0.034],G1/S比值下降(1.74±0.06比2.31±0.
作者:杨成迪;李鹏;杨潇;程义东;李鹏超;吕强;张炜
来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 10期