目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-145对人韧带成纤维细胞(HLFs)向成骨细胞分化的影响及其可能的作用机制.方法 用含地塞米松、抗坏血酸和β-磷酸甘油培养液诱导HLFs细胞向成骨细胞分化,过表达或抑制细胞中miR-145水平,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,Western blot分析骨代谢相关细胞因子以及Notch通路相关蛋白表达,荧光素酶报告基因方法检测miR-145靶基因.结果 强直性脊柱炎患者骨化韧带组织中miR-145表达水平显著下降(0.21±0.09比0.64±0.13;t=7.543,P=0.000);与正常组比较,诱导液处理可显著抑制miR-145的表达(0.22±0.09比0.73±0.13;t=4.812,P=0.009),提高ALP、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、Runt相关基因2(Runx2)水平(157.9±23.8比76.7±19.2,t=-4.599,P=0.010;1.01±0.21比0.32 ±0.10,t=-5.138,P=0.007;0.95±0.32比0.27±0.08,t=-3.571,P=0.023),同时抑制破骨细胞分化因子核因子κB受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)表达(0.30±0.17比0.74±0.13,t=3.561,P=0.024;0.36±0.11比0.85±0.20,t=3.718,P=0.021),miR-145过表达可显著削弱诱导液预处理带来的上述改变,而miR-145敲减可增加诱导液的作用;同时miR-145敲减可显著增加诱导液预处理诱导的Notch1、Hes1蛋白表达上调(1.81±0.19比1.20±0.23,t
作者:王亚寒;罗建平;王小刚;杨彬;崔力扬
来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 11期