目的 观察胰腺癌PanC1细胞中组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)对E3泛素连接酶(Ring1B)抑制抑癌基因p16转录及表达作用的影响.方法 通过采用短发夹RNA(shRNA)分别在PanC1细胞中敲除Ring1B(重复2组为shRing1 B#1、#2)和LSD1基因(shLSD1#1、#2),未敲除组为shLuc,分别通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测PanC1细胞LSD1、Ring1B和p16基因的表达;而后通过质粒转染过表达Ring1B,再敲除LSD1基因,检测PanC1细胞p16的表达.结果 Ring1B基因敲除后RT-qPCR结果显示p16 mRNA转录增加,shRing1 B#1、shRing1 B#2(4.613±0.416、4.615±0.224)高于shLuc(1.010 ±0.032)(P=0.000);Western blot结果显示Ring1B基因敲除组p16蛋白表达增加;LSD1基因敲除后p16 mRNA转录和蛋白表达也增加,shLSD1#1、shLSD1 #2组和shLuc组对应数值分别为4.704±0.503、3.885 ±0.011和1.008±0.027(P =0.005).Ring1B过表达的PanC1细胞中(Ring1B组),LSD1敲除组shLSD1+vector组(5.893±0.986)高于对照组shLuc+ vector组(1.010 ±0.201);shLSD1+ Ring1B组(0.695±0.031)高于shLuc+ Ring1B组(0.156 ±0.016) (P =0.001).结论 LSD1与Ring1B协同作用,共同参与抑制胰腺癌p16的转录表达;LSD1能够增强Ring1B抑制p16转录的作用.|

作者：陈辉星；陈实；李小燕；陈明源；严茂林；黄龙

来源：中华实验外科杂志 2017 年 34卷 11期