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目的 观察共刺激分子B7-H3对食管癌细胞株Eca-109增殖、迁移及侵袭等细胞生物学特性的影响.方法 慢病毒感染并经过流式分选,构建B7-H3稳定下调表达的Eca-109细胞(LV-B7-H3-siRNA)及对照组Eca-109细胞(LV-NC),采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot验证B7-H3干扰后mRNA及蛋白的表达水平,细胞增殖实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测并分析LV-B7-H3-siRNA组及LV-NC组Eca-109细胞的增殖、迁移及侵袭能力的差异.结果 通过RNA干扰(RNAi)技术成功构建B7-H3稳定下调表达的食管癌细胞株Eca-109.细胞计数试剂盒(CCK-8)检测结果显示,细胞接种后第2天(0.31 ±0.03比0.36±0.02)、第4天(0.51±0.04比0.60±0.04)、第5天(0.60±0.02比0.70±0.03)、第6天(0.65±0.05比0.76±0.03),LV-B7-H3-siRNA组的增殖速率低于LV-NC组,差异有统计学意义(P=0.011、0.024);划痕实验结果显示,在划痕后12 h[(38.0±28.1)比(467.7±30.3)像素]、20 h[(509.7±6.2)比(403.3±16.7)像素]、24 h[(454.7±19.9)比(355.0±32.1)像素],LV-B7-H3-siRNA组Eca-109细胞的相对迁移距离高于LV-NC组,差异有统计学意义(P =0.042、0.001、0.010);Transwell侵袭实验表明,细胞接种24h后,LV-B7-H3-siRNA组侵袭细胞数量[(258.8±29.

作者:王琦;陈陆俊;陆明洋;郑晓;刘检;周怡;蒋敬庭

来源:中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期

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作者:
王琦;陈陆俊;陆明洋;郑晓;刘检;周怡;蒋敬庭
来源:
中华实验外科杂志 2017 年 34卷 12期
标签:
共刺激分子 B7-H3 食管癌 侵袭 转移 Co-stimulatory molecule B7-H3 Esophageal cancer Invasion Metastasis
目的 观察共刺激分子B7-H3对食管癌细胞株Eca-109增殖、迁移及侵袭等细胞生物学特性的影响.方法 慢病毒感染并经过流式分选,构建B7-H3稳定下调表达的Eca-109细胞(LV-B7-H3-siRNA)及对照组Eca-109细胞(LV-NC),采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot验证B7-H3干扰后mRNA及蛋白的表达水平,细胞增殖实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测并分析LV-B7-H3-siRNA组及LV-NC组Eca-109细胞的增殖、迁移及侵袭能力的差异.结果 通过RNA干扰(RNAi)技术成功构建B7-H3稳定下调表达的食管癌细胞株Eca-109.细胞计数试剂盒(CCK-8)检测结果显示,细胞接种后第2天(0.31 ±0.03比0.36±0.02)、第4天(0.51±0.04比0.60±0.04)、第5天(0.60±0.02比0.70±0.03)、第6天(0.65±0.05比0.76±0.03),LV-B7-H3-siRNA组的增殖速率低于LV-NC组,差异有统计学意义(P=0.011、0.024);划痕实验结果显示,在划痕后12 h[(38.0±28.1)比(467.7±30.3)像素]、20 h[(509.7±6.2)比(403.3±16.7)像素]、24 h[(454.7±19.9)比(355.0±32.1)像素],LV-B7-H3-siRNA组Eca-109细胞的相对迁移距离高于LV-NC组,差异有统计学意义(P =0.042、0.001、0.010);Transwell侵袭实验表明,细胞接种24h后,LV-B7-H3-siRNA组侵袭细胞数量[(258.8±29.