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目的 观察节律基因BMAL1对人软骨细胞中胰岛素样生长因子1(IGF-1)信号的调控作用.方法 人膝关节软骨细胞随机分为对照组、IGF-1组(100 ng/ml,12 h)、si-control+ IGF-1组、si-BMAL1+ IGF-1组、AG-1024组.IGF-1处理之前,si-control+ IGF-1组和si-BMAL1+ IGF-1组细胞分别先转染对照和靶向BMAL1的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,AG-1024组细胞添加10 nmol/L AG-1024预处理12 h.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测BMAL1等蛋白的表达.结果 处理24h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(0.293 ±0.018比0.248±0.018,P=0.000;0.285 ±0.015比0.248 ±0.018,P=0.000),AG-1024组则降低(0.182 ±0.009比0.248 ±0.018,P =0.000);48 h和72 h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(48 h:0.422±0.023比0.342±0.027,P=0.000;0.405±0.026比0.342 ±0.027,P =0.000;72 h:0.508 ±0.029比0.411 ±0.026,P =0.000;0.506±0.025比0.411±0.026,P =0.000),si-BMAL1+ IGF-1组和AG-1024组则低于对照组(48 h:0.284 ±0.017比0.342 ±0.027,P =0.000;0.224 ±0.015比0.342±0.027,P=0.000,72 h:0.326±0.022比0.411±0.026,P=0.000;0.273 ±±0.013比0.411 ±±0.

作者:李宁;刘鸣;刘宏建;李军伟;夏磊

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 2期

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作者:
李宁;刘鸣;刘宏建;李军伟;夏磊
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 2期
标签:
BMAL1 软骨细胞 胰岛素样生长因子1 Ⅱ型胶原蛋白 蛋白聚糖 BMAL1 Chondrocytes Insulin-like growth factor 1 Type Ⅱ collagen Aggrecan
目的 观察节律基因BMAL1对人软骨细胞中胰岛素样生长因子1(IGF-1)信号的调控作用.方法 人膝关节软骨细胞随机分为对照组、IGF-1组(100 ng/ml,12 h)、si-control+ IGF-1组、si-BMAL1+ IGF-1组、AG-1024组.IGF-1处理之前,si-control+ IGF-1组和si-BMAL1+ IGF-1组细胞分别先转染对照和靶向BMAL1的短发卡RNA(shRNA)慢病毒载体,AG-1024组细胞添加10 nmol/L AG-1024预处理12 h.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测BMAL1等蛋白的表达.结果 处理24h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(0.293 ±0.018比0.248±0.018,P=0.000;0.285 ±0.015比0.248 ±0.018,P=0.000),AG-1024组则降低(0.182 ±0.009比0.248 ±0.018,P =0.000);48 h和72 h后,IGF-1组和si-control+ IGF-1组细胞活性高于对照组(48 h:0.422±0.023比0.342±0.027,P=0.000;0.405±0.026比0.342 ±0.027,P =0.000;72 h:0.508 ±0.029比0.411 ±0.026,P =0.000;0.506±0.025比0.411±0.026,P =0.000),si-BMAL1+ IGF-1组和AG-1024组则低于对照组(48 h:0.284 ±0.017比0.342 ±0.027,P =0.000;0.224 ±0.015比0.342±0.027,P=0.000,72 h:0.326±0.022比0.411±0.026,P=0.000;0.273 ±±0.013比0.411 ±±0.