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目的 探讨Oct4B1基因过表达是否增强结直肠癌SW620细胞对奥沙利铂耐药性及其机制,以及与诱导细胞上皮-间充质转化(EMT)过程的关系.方法 实验分组:将SW620细胞随机平均分为实验组及对照组、实验组(SW620-Oct4B1):转染带G418抗性的Oct4B1过表达质粒;对照组(SW620-NC):转染带G418抗性的阴性对照质粒;筛选合适浓度G418建立稳定转染细胞株.对稳定转染两组细胞作如下检测:(1)噻唑蓝(MTT)法检测细胞对不同浓度奥沙利铂的敏感性;(2)Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)及EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达;(3)划痕实验检测12、24 h迁移能力;(4)Transwell小室检测24 h时侵袭能力.结果 实验组与对照组比较:(1)对奥沙利铂敏感性实验组明显低于对照组(t =8.889、5.427、9.678、4.459、5.362,P=0.001、0.006、0.001、0.011、0.006);(2)P-gp表达两组分别为0.401、0.439、0.419(0.420±0.020)及0.099、0.110、0.120(0.110 ±0.010),实验组明显高于对照组(t=24.723,P=0.000);(3)12 h伤痕愈合率分别为32.196%、32.382%、33.441% (32.670 ±0.670)%及23.049%、25.286%、23.674% (24.000±1.150)%,实验组明显高于对照组(f=11.245,P=0.001);24 h伤痕愈合率分别为67.048%、68.650%、66.291

作者:陈正权;文坤明;陈奕霖;胡水清;曾庆良

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 5期

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作者:
陈正权;文坤明;陈奕霖;胡水清;曾庆良
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 5期
标签:
结直肠癌 Oct4B1 上皮-间充质转化 耐药性 Colorectal cancer Oct4B1 Epithelial mesenchymal transition Drug resistance
目的 探讨Oct4B1基因过表达是否增强结直肠癌SW620细胞对奥沙利铂耐药性及其机制,以及与诱导细胞上皮-间充质转化(EMT)过程的关系.方法 实验分组:将SW620细胞随机平均分为实验组及对照组、实验组(SW620-Oct4B1):转染带G418抗性的Oct4B1过表达质粒;对照组(SW620-NC):转染带G418抗性的阴性对照质粒;筛选合适浓度G418建立稳定转染细胞株.对稳定转染两组细胞作如下检测:(1)噻唑蓝(MTT)法检测细胞对不同浓度奥沙利铂的敏感性;(2)Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)及EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达;(3)划痕实验检测12、24 h迁移能力;(4)Transwell小室检测24 h时侵袭能力.结果 实验组与对照组比较:(1)对奥沙利铂敏感性实验组明显低于对照组(t =8.889、5.427、9.678、4.459、5.362,P=0.001、0.006、0.001、0.011、0.006);(2)P-gp表达两组分别为0.401、0.439、0.419(0.420±0.020)及0.099、0.110、0.120(0.110 ±0.010),实验组明显高于对照组(t=24.723,P=0.000);(3)12 h伤痕愈合率分别为32.196%、32.382%、33.441% (32.670 ±0.670)%及23.049%、25.286%、23.674% (24.000±1.150)%,实验组明显高于对照组(f=11.245,P=0.001);24 h伤痕愈合率分别为67.048%、68.650%、66.291