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目的 探讨B16黑素瘤细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)信号调控机制,以及该信号通路对淋巴内皮细胞(LEC)增殖的影响.方法 将B16细胞iNOS信号调控实验分为4组:空白对照组、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)处理组、VEGF-C +iNOS拮抗剂氨基胍(Ag)组、VEGF-C+VEGF受体-3(VEGFR-3)拮抗剂MAZ-51组.培养48 h后用实时定量聚合酶链反应、Western blot、硝酸还原酶法检测细胞中iNOS的mRNA、蛋白的表达水平及一氧化氮(NO)的生成量.LEC增殖实验中对小鼠LEC及B16细胞共培养,分为6组:A组(单纯LEC)、B组(LEC+ VEGF-C)、C组(LEC+B16)、D组(LEC+ B16+ VEGF-C)、E组(LEC+ B16+ VEGF-C+ Ag)、F组(LEC+ B16+ VEGF-C+MAZ-51).采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测LEC增殖.结果 iNOS信号调控实验中,VEGF-C组中B16细胞iNOS mRNA及蛋白的表达水平较空白对照组均显著提高(1.10±0.03比0.69±0.02,P=0.008),而加有Ag或MAZ-51组中iNOS mRNA及蛋白的表达水平不仅低于VEGF-C组(0.35±0.03比1.10±0.03,P=0.005;0.42 ±0.02比1.10 ±0.03,P=0.004),且低于空白对照组(0.35±0.03比0.69±0.02,P=0.028;0.42±0.02比0.69±0.02,P=0.025).对NO检测后发现VEGF-C组中NO的吸光度(A)值为0.25±0.03,明显高于空白对照组(0.19 ±0.03,P=0.008),且显

作者:赵伟;赵斌;原杰;王智权;赵轶波;陆向东;王永峰

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 8期

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作者:
赵伟;赵斌;原杰;王智权;赵轶波;陆向东;王永峰
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 8期
标签:
黑素瘤 血管内皮生长因子-C 血管内皮生长因子受体-3 诱导型一氧化氮合酶 淋巴内皮细胞 Melanoma Vascular endothelial growth factor-C Vascular endothelial growth factor receptors-3 Induced nitric oxide enzyme Lymphatic endothelial cell
目的 探讨B16黑素瘤细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)信号调控机制,以及该信号通路对淋巴内皮细胞(LEC)增殖的影响.方法 将B16细胞iNOS信号调控实验分为4组:空白对照组、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)处理组、VEGF-C +iNOS拮抗剂氨基胍(Ag)组、VEGF-C+VEGF受体-3(VEGFR-3)拮抗剂MAZ-51组.培养48 h后用实时定量聚合酶链反应、Western blot、硝酸还原酶法检测细胞中iNOS的mRNA、蛋白的表达水平及一氧化氮(NO)的生成量.LEC增殖实验中对小鼠LEC及B16细胞共培养,分为6组:A组(单纯LEC)、B组(LEC+ VEGF-C)、C组(LEC+B16)、D组(LEC+ B16+ VEGF-C)、E组(LEC+ B16+ VEGF-C+ Ag)、F组(LEC+ B16+ VEGF-C+MAZ-51).采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测LEC增殖.结果 iNOS信号调控实验中,VEGF-C组中B16细胞iNOS mRNA及蛋白的表达水平较空白对照组均显著提高(1.10±0.03比0.69±0.02,P=0.008),而加有Ag或MAZ-51组中iNOS mRNA及蛋白的表达水平不仅低于VEGF-C组(0.35±0.03比1.10±0.03,P=0.005;0.42 ±0.02比1.10 ±0.03,P=0.004),且低于空白对照组(0.35±0.03比0.69±0.02,P=0.028;0.42±0.02比0.69±0.02,P=0.025).对NO检测后发现VEGF-C组中NO的吸光度(A)值为0.25±0.03,明显高于空白对照组(0.19 ±0.03,P=0.008),且显