目的 观察Apollon对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/顺铂(DDP)的顺铂耐药性影响.方法 采用小于扰RNA(siRNA)瞬时转染技术沉默Apollon;噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度顺铂(10、20、40、80、100 μmol/L)对转染后细胞24 h的增殖抑制作用;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后MCF-7/DDP细胞中相关基因mRNA的水平变化;Western blot检测转染后细胞中蛋白水平的变化.结果 在乳腺癌耐药细胞株MCF-7/DDP中Apollon mRNA和蛋白表达水平分别为MCF-7细胞的(1.70 ±0.21)倍(P=0.007)和(2.23±0.33)倍(P=0.003);转染Apollon siRNA后的MCF-7/DDP与未转染组比较,对顺铂的敏感性增强,顺铂半数抑制浓度(IC5.)由(81.39 ±3.67) μmol/L,下降到(33.24±2.01) μmol/L(P=0.002);转染后细胞中Apollon、β-连环蛋白(β-catenin)在mRNA及蛋白水平相较于未转染细胞均出现明显下降,分别为未转染细胞的(0.43±0.16)倍(P =0.005)、(0.54 ±0.10)倍(P =0.006)和(0.23 0.08)倍(P=0.003)、(0.44±0.20)倍(P=0.005);采用lμmol/L WAY-262611处理转染后的细胞,Apollon mRNA及蛋白水平无明显改变(P=0.890、0.730),β-catenin mRNA[(1.91 ±0.23)倍(P=0.004)]及蛋白水平[(2.21±0.31)倍(P=0.002)]显著升高.结论 沉默Apollon能增加乳腺癌耐药细
作者:吴珏堃;刘义;蔡建业
来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 11期