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目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-1243过表达对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖和迁移的生物学影响.方法 利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测甲状腺乳头状癌2×105个TPC-1细胞不同转染组miR-1243的表达,水溶性甲臢化合物(MRS)法检测2×104个细胞的增殖能力及迁移小室(Transwell)检测1×105对数生长期的TPC-1细胞的迁移能力.利用生物信息学软件预测miR-1243的靶基因.采用双荧光素酶报告基因验证miR-1243对靶基因的直接调控.结果 空白对照和阴性对照组中miR-1243的表达量分别为0.97±0.31,1.208±0.40,显著低于miR-1243模拟物转染组932.84±52.34,差异有统计学意义(P=0.000);细胞转染48h后,空白对照及阴性对照组细胞相对存活率分别为4.82±0.10和4.91±0.09,显著高于miR-1243模拟物转染组4.41 ±0.06,细胞转染miR-1243的增殖能力被显著抑制(P=0.032).miR-1243模拟物转染组迁移细胞数为15.5±6.5,均少于空白对照组33.5±9.5和阴性对照组31.75±10.75,差异均有统计学意义(P=0.016).经过生物信息学网站miRanda和RNAhybrid共同分析,可见AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1) mRNA是miR-1243的潜在靶基因.双荧光素酶报告基因结果显示,与空载体组(98.97±9.96),突变组(85.02±11.04)及阴性对照模拟物组(97.38±

作者:底旺;冀宏;李清怀

来源:中华实验外科杂志 2018 年 35卷 12期

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作者:
底旺;冀宏;李清怀
来源:
中华实验外科杂志 2018 年 35卷 12期
标签:
甲状腺乳头状癌 微小RNA-1243 细胞增殖 细胞迁移 AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1 Thyroid papillary carcinoma MicroRNA-124 Cell proliferation Cell migration AKT serine/threonine kinase 1
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-1243过表达对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖和迁移的生物学影响.方法 利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测甲状腺乳头状癌2×105个TPC-1细胞不同转染组miR-1243的表达,水溶性甲臢化合物(MRS)法检测2×104个细胞的增殖能力及迁移小室(Transwell)检测1×105对数生长期的TPC-1细胞的迁移能力.利用生物信息学软件预测miR-1243的靶基因.采用双荧光素酶报告基因验证miR-1243对靶基因的直接调控.结果 空白对照和阴性对照组中miR-1243的表达量分别为0.97±0.31,1.208±0.40,显著低于miR-1243模拟物转染组932.84±52.34,差异有统计学意义(P=0.000);细胞转染48h后,空白对照及阴性对照组细胞相对存活率分别为4.82±0.10和4.91±0.09,显著高于miR-1243模拟物转染组4.41 ±0.06,细胞转染miR-1243的增殖能力被显著抑制(P=0.032).miR-1243模拟物转染组迁移细胞数为15.5±6.5,均少于空白对照组33.5±9.5和阴性对照组31.75±10.75,差异均有统计学意义(P=0.016).经过生物信息学网站miRanda和RNAhybrid共同分析,可见AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1) mRNA是miR-1243的潜在靶基因.双荧光素酶报告基因结果显示,与空载体组(98.97±9.96),突变组(85.02±11.04)及阴性对照模拟物组(97.38±