目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-145通过调节锌指蛋白转录因子5(KLF5)对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及侵袭能力的影响.方法 利用TargetScan和PicTar对人甲状腺乳头状癌K1细胞株的miR-145靶基因进行预测,采用双荧光素酶报告基因验证miR-145对靶基因的直接调控.应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测转染miR-145模拟物及miR-145模拟物同时过表达KLF5的甲状腺乳头状癌K1细胞在4d的吸光度(A450)值以判断其增殖能力.应用平板克隆形成实验检测转染miR-145模拟物及miR-145模拟物同时过表达KLF5的甲状腺乳头状癌K1细胞孵育2周后克隆细胞的数量以判断其克隆能力.应用Transwell侵袭实验检测转染miR-145模拟物及miR-145模拟物同时过表达KLF5的甲状腺乳头状癌K1细胞孵育48 h后穿膜细胞数以判断其侵袭能力.结果 TargetScan和PicTar软件预测显示KLF5基因是miR-145的潜在靶基因.双荧光报告基因的相对荧光值显示,与共转染miR-145模拟物和KLF5-mt组比较,共转染miR-145模拟物和KLF5-wt组荧光素酶活性显著下降(t=14.907,P＜0.01).CCK-8实验结果显示,miR-145模拟物转染组K1细胞在4d检测到的A450nm值(0.433±0.003)明显低于阴性对照组及共转染miR-145模拟物和过表达KLF5组(0.534±0.004、0.522±0.005),差异有统计学意义(t=29.954、22.816

作者：石东亮；陈亮；杨猛；杨文华；丁明剑

来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 4期