目的 探讨尿酸在诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应中的作用及其作用机制.方法 浓度分别为0、8、12、16 mg/dl的尿酸处理前列腺上皮细胞RWPE-1细胞,倒置显微镜观察RWPE-1细胞的生长及形态学变化;Western blot方法检测RWPE-1细胞内Toll样受体4(TLR-4)、核转录因子-κBp65 (NF-κBp65)、κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性蛋白的表达变化;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测IKKα、IKKβ、NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)的mRNA表达变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化.结果 倒置显微镜观察显示,RWPE-1细胞形态学变化与尿酸作用具有浓度依赖关系;RWPE-1细胞中TLR4、NF-κBp65、IKKα、IKKβ、NLRP3炎性蛋白的表达水平随尿酸浓度的增高而增高,呈正相关(P<0.05);随着尿酸的浓度升高,IKKα、IKKβ、NLRP3、Caspase-1基因的表达呈上调趋势,呈正相关(P<0.05);尿酸刺激RWPE-1细胞12 h后,各组(0、8、12、16 mg/dl) TNF-α含量分别为:(9.69±0.22)、(9.56±0.47)、(9.63±0.51)、(10.08±0.11) ng/L,IL-1β分别为:(7.75±0.52)、(7.85±0.87)、(9.27±1.
作者:张坤;胡建鹏;徐致鹏;谈建;汤华明;崔飞伦
来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 4期