目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-4287对人软骨细胞聚蛋白多糖酶-2(ADAMTS5)的调控作用及其机制.方法 从膝关节软骨组织中分离得到软骨细胞,白细胞介素(IL)-1β诱导软骨炎症模型,过表达或抑制细胞中miR-4287水平,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-4287和ADAMTS5 mRNA及蛋白表达,双荧光素酶报告基因方法验证miR-4287与ADAMTS5 mRNA 3'非翻译区(UTR)的结合效应.结果 miR-4287在人骨关节炎(0A)软骨组织中表达较正常软骨组织减少(0.354±0.167比1.074±0.507;t=3.010,P＜0.05),而ADAMTS5 mRNA表达升高(21.019±7.044比1.902±2.081;t=-5.820,P＜0.01).与未刺激组比较,IL-1β刺激软骨细胞12 h后,miR-4287表达降低(0.454±0.095比1.010±0.166;t=11.410,P＜0.01),而ADAMTS5 mRNA表达增多(5.067±0.994比1.006±0.137;t=7.306,P＜0.05).转染miR-4287模拟物48 h后,软骨细胞内ADAMTS5 RNA(0.620±0.366比1.023±0.269;t=6.047,P＜0.05)和蛋白表达均降低;而转染miR-4287抑制剂后,软骨细胞内ADAMTS5 RNA(2.502±0.625比1.018±0.226;t=5.637,P＜0.05)和蛋白表达均升高.结合位点为野生型时,过表达miR-4287能降低报告载体的荧光素酶活性(0.789±0.088比1.018±0.226;t=2.806,P＜0.05

作者：孙红；张志奇；毛谷平；黄志宇；余宝禧；张程云；傅明

来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 5期