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目的 观察肿瘤相关成纤维细胞对胆管癌细胞RBE生长的影响.方法 收集2016年6月至2017年5月来杭州师范大学附属医院诊断为临床原发性胆管癌患者的肿瘤组织分离到的肿瘤相关成纤维细胞(CAF),建立了CAF和癌旁成纤维细胞(PTF)的原代培养,并采用流式细胞术检测细胞内波形蛋白(Vimentin)和细胞角蛋白(Cytokeratin)的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测成纤维细胞标记蛋白成纤维细胞激活蛋白(FAPα)、成纤维特异性蛋白1(FSP1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.在CAF和RBE共培养的条件下,流式分析细胞增殖和凋亡,Transwell检测迁移、侵袭.应用SPSS 2.0软件统计分析.计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验.结果 与PTF比较,CAF中FSP1、FAPα、α-SMA表达水平更高,Vimentin阳性率更高;在共培养条件下,CAF比PTF能显著提高胆管癌RBE细胞的增殖活性[(5.97±1.59)%]比[(1.59±0.35)%],促进RBE的侵袭[24 h,(86.76±6.11)%比(51.33±4.04)%]和迁移[24 h,(103.33±5.73)%比(87.00±4.85)%],差异有统计学意义(t=2.776,均P<0.05),但不影响RBE的凋亡,差异无统计学意义(t=2.776,P>0.05).结论 胆管癌相关成纤维细胞CAF能促进RBE的侵袭和迁移,在胆管癌转移过程中起着重要作用.

作者:武伟;孟柠;潘志坚;李杭;何桦波;李国兰

来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 7期

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作者:
武伟;孟柠;潘志坚;李杭;何桦波;李国兰
来源:
中华实验外科杂志 2019 年 36卷 7期
标签:
肿瘤相关成纤维细胞 增殖 侵袭 转移 胆管癌 Cancer-associated fibroblasts Proliferation Invasion Migration Cholangiocarcinoma
目的 观察肿瘤相关成纤维细胞对胆管癌细胞RBE生长的影响.方法 收集2016年6月至2017年5月来杭州师范大学附属医院诊断为临床原发性胆管癌患者的肿瘤组织分离到的肿瘤相关成纤维细胞(CAF),建立了CAF和癌旁成纤维细胞(PTF)的原代培养,并采用流式细胞术检测细胞内波形蛋白(Vimentin)和细胞角蛋白(Cytokeratin)的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测成纤维细胞标记蛋白成纤维细胞激活蛋白(FAPα)、成纤维特异性蛋白1(FSP1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.在CAF和RBE共培养的条件下,流式分析细胞增殖和凋亡,Transwell检测迁移、侵袭.应用SPSS 2.0软件统计分析.计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验.结果 与PTF比较,CAF中FSP1、FAPα、α-SMA表达水平更高,Vimentin阳性率更高;在共培养条件下,CAF比PTF能显著提高胆管癌RBE细胞的增殖活性[(5.97±1.59)%]比[(1.59±0.35)%],促进RBE的侵袭[24 h,(86.76±6.11)%比(51.33±4.04)%]和迁移[24 h,(103.33±5.73)%比(87.00±4.85)%],差异有统计学意义(t=2.776,均P<0.05),但不影响RBE的凋亡,差异无统计学意义(t=2.776,P>0.05).结论 胆管癌相关成纤维细胞CAF能促进RBE的侵袭和迁移,在胆管癌转移过程中起着重要作用.