目的 探讨嘌呤受体P2X7在电磁场调节骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化中的作用及其分子机制.方法 体外分离培养4周龄雄性SD大鼠BMSCs,取第3代细胞实验.用1mT、7.5～75.0 Hz的正弦波电磁场刺激BMSCs 1周后,使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测P2X7受体表达,筛选出作用最强的电磁场参数;用筛选出的电磁场刺激含有或者不含P2X7受体拮抗剂A740003(5μmol/L)的成骨诱导培养基诱导的BMSCs 1周,RT-qPCR和Western blot检测Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)及骨桥蛋白(OPN)的表达,Western blot检测磷酸化的蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)及胞内β-连环蛋白(β-catenin)的表达.计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,采用ANOVA方差分析.结果 1 mT、15 Hz电磁场促进P2X7受体表达作用最强,其mRNA和蛋白相对表达量分别是对照组的2.0倍和1.9倍.1mT、15 Hz电磁场组RUNX2、ALP及OPN的mRNA相对表达量分别是对照组的2.1、5.3、3.7倍,蛋白相对表达量分别是对照组的1.3、1.6、1.5倍.含有A740003的成骨诱导培养基诱导的BMSCs受1 mT、15 Hz电磁场刺激后,RUNX2、ALP及OPN的mRNA相对表达量与单独电磁场组比较分别下降36％、42％和41％,蛋白相对表达量与单独电磁场组比较分

作者：李文凯；张英驰；杨勇；刘朝旭；吴华；游洪波

来源：中华实验外科杂志 2019 年 36卷 7期