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目的 观察经骨髓间充质干细胞条件培养基培养的退变髓核细胞的生物学活性及细胞外基质表达的变化.方法 (1)从成年SD大鼠股骨和胫骨中提取骨髓间充质干细胞,传代培养后,收集骨髓间充质干细胞条件培养基;(2)取成年大鼠,破坏其椎间盘纤维环,2周后获得椎间盘退变大鼠模型,提取大鼠脊柱髓核细胞;(3)以骨髓间充质干细胞条件培养基培养髓核细胞24 h.结果 与正常髓核细胞比较,退变髓核细胞的活性[(59.43±12.33)%,t=11.647,P<0.01]明显降低,细胞中Ⅱ型胶原(0.50 ±0.12,t=14.677,P<0.01、0.49 ±0.17,t =7.153,P<0.01)、蛋白聚糖(0.72 ±0.23,t=15.436,P<0.01、0.26±0.32,t=8.816,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显减少,基质金属蛋白酶-3(1.48 ±0.31,t=15.436,P<0.01、2.00±0.24,t=29.640,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显增多.而骨髓间充质干细胞条件培养基可显著恢复退变髓核细胞的活性(79.62±10.11,t=4.786,P<0.01),并促进细胞中Ⅱ型胶原(1.23 ±0.16,t=10.933,P<0.01;0.74±0.16,f=3.506,P<0.01)、蛋白聚糖蛋白(1.49 ±0.28,t=9.359,P<0.01;0.99±0.37,t=6.846,P<0.01)及mRNA表达,降低基质金属蛋白酶-3(0.49 ±0.39,t=9.359,P<0.01;0.89±0.12,t=21.934,P<0.01)蛋白及mRNA表达,但骨髓间充质干

作者:张宁峰;袁俊虎;苏帆;邓志钦;段莉;王大平

来源:中华实验外科杂志 2019 年 36卷 11期

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作者:
张宁峰;袁俊虎;苏帆;邓志钦;段莉;王大平
来源:
中华实验外科杂志 2019 年 36卷 11期
标签:
椎间盘突出 髓核细胞 细胞外基质 骨髓间充质干细胞条件培养基 Ⅱ型胶原 蛋白聚糖 基质金属蛋白酶-3 Intervertebral disc herniation Nucleus pulposus cells Extracellular matrix protein Bone marrow mesenchymal stem cell conditioned medium Type Ⅱ collagen Aggrecan Matrix metalloproteinase 3
目的 观察经骨髓间充质干细胞条件培养基培养的退变髓核细胞的生物学活性及细胞外基质表达的变化.方法 (1)从成年SD大鼠股骨和胫骨中提取骨髓间充质干细胞,传代培养后,收集骨髓间充质干细胞条件培养基;(2)取成年大鼠,破坏其椎间盘纤维环,2周后获得椎间盘退变大鼠模型,提取大鼠脊柱髓核细胞;(3)以骨髓间充质干细胞条件培养基培养髓核细胞24 h.结果 与正常髓核细胞比较,退变髓核细胞的活性[(59.43±12.33)%,t=11.647,P<0.01]明显降低,细胞中Ⅱ型胶原(0.50 ±0.12,t=14.677,P<0.01、0.49 ±0.17,t =7.153,P<0.01)、蛋白聚糖(0.72 ±0.23,t=15.436,P<0.01、0.26±0.32,t=8.816,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显减少,基质金属蛋白酶-3(1.48 ±0.31,t=15.436,P<0.01、2.00±0.24,t=29.640,P<0.01)蛋白及mRNA表达水平明显增多.而骨髓间充质干细胞条件培养基可显著恢复退变髓核细胞的活性(79.62±10.11,t=4.786,P<0.01),并促进细胞中Ⅱ型胶原(1.23 ±0.16,t=10.933,P<0.01;0.74±0.16,f=3.506,P<0.01)、蛋白聚糖蛋白(1.49 ±0.28,t=9.359,P<0.01;0.99±0.37,t=6.846,P<0.01)及mRNA表达,降低基质金属蛋白酶-3(0.49 ±0.39,t=9.359,P<0.01;0.89±0.12,t=21.934,P<0.01)蛋白及mRNA表达,但骨髓间充质干