目的:探讨聚凝胺对小鼠骨髓源树突状细胞(BMDCs)的毒性作用以及聚凝胺促慢病毒载体转染BMDCs的最佳浓度。方法:制备BMDCs悬液，随机分为实验组和对照组。实验组用不同浓度的聚凝胺处理，对照组中加入等量磷酸盐缓冲液(PBS)，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标记法评价聚凝胺对BMDCs的毒性作用。向BMDCs悬液中加入慢病毒载体[感染复数(MOI)＝10]，实验组用不同浓度的聚凝胺处理，对照组加入等量PBS，每天采用荧光显微镜动态观察各组绿色荧光蛋白(GFP)表达。刺激BMDCs成熟后，采用流式细胞术定量检测GFP表达。各组之间两两比较采用独立样本
t检验。
结果:聚凝胺浓度≥11 mg/L时，活细胞数目显著减少[吸光度(
A)值(0.881±0.007)比(1.031±0.017)，
t＝7.832，
P<0.05]，差异有统计学意义。安全浓度范围内，使用聚凝胺能显著提高GFP表达，聚凝胺浓度为8 mg/L时，GFP表达最高。
结论:聚凝胺对BMDCs存在剂量依赖的毒性作用，安全浓度范围内，聚凝胺可明显提高慢病毒载体对BMDCs的转染率，最适浓度为8 mg/L。
作者：孙凯伦；张季；宫念樵
来源：中华实验外科杂志 2020 年 37卷 1期
