目的:探讨阿魏酸通过调节磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路诱导食管癌细胞周期阻滞和自噬的机制。方法:2018年12月至2019年6月于中国科学院细胞库购买食管癌细胞ECA109和正常细胞Het-1A进行实验；体外培养食管癌细胞ECA109，分别使用不同浓度的阿魏酸作用正常细胞Het1-A和食管癌细胞ECA109，检测阿魏酸对两者的毒性影响。将食管癌细胞分为：对照组(Ctrl)、低剂量阿魏酸组(5 μmol/L)、中剂量阿魏酸组(10 μmol/L)和高剂量阿魏酸组(20 μmol/L)；分别使用对应剂量的阿魏酸处理食管癌细胞，使用蛋白质印迹检测细胞核增殖抗原(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA)、周期相关蛋白p21、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、Cyclin E的表达、自噬相关蛋白p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达、PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达；使用免疫荧光检测LC3水平；加入通路激活剂3-methyladenine 5 mmol/L后，再次蛋白质印迹检测通路相关蛋白的表达、不同周期细胞比例和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值。采用SPSS 22.0对所得的数据进行分析，组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD法。结果:与Ctrl组比较，10 μmol/L组Ki-67、PCNA、Cyclin D1、Cyclin E、p62蛋白，p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR比例，S期细
作者：毛广显；刘继先；鲁建军
来源：中华实验外科杂志 2020 年 37卷 9期
