目的:探讨Beclin1对肺癌细胞紫杉醇耐药的影响及其分子机制。方法:人非小细胞肺癌A549和小鼠LLC Lewis肺癌细胞采用梯度递增法建立紫杉醇耐药细胞株A549/DOX和LLC/DOX。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析耐药和非耐药细胞株Beclin1蛋白表达水平。采用对照慢病毒和Beclin1慢病毒感染A549/DOX和LLC/DOX,建立A549/DOX组、A549/DOX/Beclin1组、LLC/DOX和LLC/DOX Beclin1组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色、克隆形成实验和体外移植瘤分析紫杉醇对4组细胞增殖的影响。采用流式细胞仪分析紫杉醇对4组细胞凋亡的影响;Western blot分析4组细胞凋亡和自噬相关蛋白表达水平。计量资料比较采用
t检验。
结果:A549/DOX组和LLC/DOX组细胞48 h吸光度(
A)值(1.63±0.05、1.72±0.13)明显高于A549/DOX/Beclin1组和LLC/DOX Beclin1组(1.09±0.13、1.21±0.06),差异有统计学意义(
t=9.895、9.624,
P<0.05)。EdU染色结果显示,A549/DOX组和LLC/DOX组细胞EdU染色阳性率[(93.71±2.81)
作者:申霖;张秋峰;乐艳青;焦鹏
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 8期