目的:探讨在激素性股骨头坏死中甲基转移酶3(METTL3)介导的m
6A修饰在骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化中的作用及其机制。
方法:收集河南省人民医院2020年9月至2021年9月因激素性股骨头坏死或股骨颈骨折行髋关节置换患者的股骨骨髓液,满足纳入标准共23例,设激素性股骨头坏死患者为坏死组共12例,股骨颈骨折患者为对照组共11例,分离培养骨髓间充质干细胞(BMSC),利用聚合酶链反应(qRT-PCR)检测METTL3在两组BMSC中的表达水平;利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组BMSC在培养24、48、72 h后的增殖活性;利用茜素红染色检测两组BMSC的成骨分化能力。利用METTL3过表达质粒上调坏死组细胞中METTL3的水平,并验证METTL3水平对坏死组BMSC增殖及成骨活性的影响,进一步通过转录组测序和m6A免疫共沉淀寻找METTL3调控的靶基因。两组间比较采用两独立样本
t检验,多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),通过Pearson相关系数检验METTL3与谷胱甘肽过氧化酶7(GPX7)之间的线性关系。
结果:坏死组BMSC中m6A含量低于对照组细胞[(3.56±1.66)
作者:赵恩哲;吴斗;刘强
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 11期