目的:探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法:对人胃癌HGC-27、SNU-1,KATO Ⅲ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平;根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5 μmol/L组、10 μmol/L组、15 μmol/L组、20 μmol/L组、25 μmol/L组、30 μmol/L组,分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力,筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度;用30 μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞,采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平,采用CCK-8检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用
t检验,多组间比较采用单因素方差分析。
结果:RT-PCR检测结果表明,与其他细胞株比较,人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14,
F=386.913,
P<0.05);CCK-8结果显示30 μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组(
F24 h=178.105,
F48 h=1 093.759,
F72 h=473.833,
作者:厉冰;尚华;梅孝臣;门中俊;翟润;孙万日
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 11期