目的:检测前信使RNA(mRNA)加工因子19(Prp19)在膀胱癌组织及细胞中的表达水平,探讨Prp19对膀胱癌细胞生物学功能的影响。方法:运用UALCAN数据库分析Prp19基因在膀胱癌组织中的表达水平,利用GEPIA数据库分析Prp19与膀胱癌患者预后的关系,收集膀胱癌及癌旁标本,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测膀胱癌及癌旁标本、正常膀胱上皮细胞及膀胱癌细胞中Prp19 mRNA和蛋白质的相对表达水平。利用免疫组织化学染色检测膀胱癌患者及其癌旁组织中Prp19蛋白的表达。在膀胱癌T24细胞中转染小干扰RNA(siRNA)-Prp19,将细胞分为转染组(si-Prp19)和对照组(NC),采用RT-qPCR和Western blot验证转染效率。利用细胞克隆形成实验和细胞计数盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力;利用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;利用Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)及上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白的表达水平;两组间比较采用
t检验。
结果:UALCAN数据库显示Prp19在膀胱癌组织中表达水平升高(
P<0.001),GEPIA数据库显示Prp19表达与患者总生存期(OS)呈负相关(
P<0.05);膀胱癌组织中Prp19 mRNA和蛋
作者:邵浩仁;王清华;柯帅;何沐;郭佳
来源:中华实验外科杂志 2022 年 39卷 12期