目的 构建勿动蛋白A胞外肽残基1-40(NEP1-40)基因工程神经干细胞(NEP1-40-NSCs)并探究其对神经元轴突再生的影响.方法 制备NEP1-40-NSCs,检测目的基因的表达量,同时鉴定其分化潜能;NEP1-40-NSCs组与神经干细胞(NSCs)组分别与大鼠海马组织神经元共培养后测量各组神经元轴突新增面积,同时鬼笔环肽染色观察生长锥及丝状伪足结构.多组间比较用单因素方差分析,两组间比较用t检验.结果NEP1-40-NSCs组β3-微管蛋白(Tuj-1)、少突胶质细胞转录因子2(Oligo2)及髓鞘碱性蛋白(MBP)所标记的阳性细胞数高于NSCs组(47.001±16.670比30.333±3.480、38.001±14.001 比 24.000±2.582、16.464±0.813 比 12.334±0.681,t=4.789、5.422、6.745,P＜0.05),而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的阳性细胞数低于NSCs组(22.002± 20.331 比 42.330±3.575,t=5.688,P＜0.05).NEP1-40-NSCs 组的轴突新增面积大于 NSCs 组[(9 096.000±4292.000)μm2 比(4 803.000±541.300)μm2,t=7.929,P＜0.05];鬼笔环肽染色结果显示与NSCs组比较,NEP1-40-NSCs组的生长锥面积增宽[(103.000±79.670)μm2 比(23.330± 8.192)μm2,t=9.725,P＜0.05],伪足数量增多且长度增加[(0.122±0.037)μm 比(0.085± 0.008)μm,t=4.513,P＜0.05].结论NEP1-40-NSCs在

作者：张弼；胡利红；李旭生；张宇飞；马俊驰；袁海峰

来源：中华实验外科杂志 2023 年 40卷 9期