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目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在体外能否够促进肾小管上皮细胞的表型转化,以及这一作用与转化生长因子β(TGF-β)的关系.方法将NRK52E肾小管上皮细胞株细胞分组处理,采用RT-PCR和Western印迹的方法检测CTGF mRNA水平和蛋白水平的表达;Western印迹和流式细胞仪观察α-SMA的表达.结果正常体外培养的NRK52E肾小管上皮细胞表达少量的CTGF,加入TGF-β1 10 ng/ml刺激48 h后,CTGF mRNA和蛋白水平的表达都显著升高,α-SMA蛋白表达和荧光强度也明显增加;同时加入TGF-β1中和抗体后,CTGF和α-SMA的表达都显著降低.经过反义寡核苷酸处理48h,几乎检测不到CTGF mRNA和蛋白的表达,并且CTGF反义寡核苷酸可以基本消除TGF-β1引起的细胞α-SMA表达增强,而相同时间和剂量的CTGF正义寡核苷酸不能引起相应的改变.结论CTGF和TGF-β1都可以促使体外培养的肾小管上皮细胞α-SMA表达增强,并且CTGF作为TGF-β1的下游效应介质而起作用,提示CTGF参与了肾小管上皮细胞的转分化.

作者:张海燕;李幼姬;叶任高;李晓燕;杜勇;孔庆瑜;梁鸣;余学清

来源:中华肾脏病杂志 2003 年 19卷 6期

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作者:
张海燕;李幼姬;叶任高;李晓燕;杜勇;孔庆瑜;梁鸣;余学清
来源:
中华肾脏病杂志 2003 年 19卷 6期
标签:
结缔组织生长因子 转分化 转化生长因子-β 肾小管上皮细胞
目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在体外能否够促进肾小管上皮细胞的表型转化,以及这一作用与转化生长因子β(TGF-β)的关系.方法将NRK52E肾小管上皮细胞株细胞分组处理,采用RT-PCR和Western印迹的方法检测CTGF mRNA水平和蛋白水平的表达;Western印迹和流式细胞仪观察α-SMA的表达.结果正常体外培养的NRK52E肾小管上皮细胞表达少量的CTGF,加入TGF-β1 10 ng/ml刺激48 h后,CTGF mRNA和蛋白水平的表达都显著升高,α-SMA蛋白表达和荧光强度也明显增加;同时加入TGF-β1中和抗体后,CTGF和α-SMA的表达都显著降低.经过反义寡核苷酸处理48h,几乎检测不到CTGF mRNA和蛋白的表达,并且CTGF反义寡核苷酸可以基本消除TGF-β1引起的细胞α-SMA表达增强,而相同时间和剂量的CTGF正义寡核苷酸不能引起相应的改变.结论CTGF和TGF-β1都可以促使体外培养的肾小管上皮细胞α-SMA表达增强,并且CTGF作为TGF-β1的下游效应介质而起作用,提示CTGF参与了肾小管上皮细胞的转分化.