目的 观察pRetro-Super(PRS)反转录病毒载体介导的表达人结缔组织生长因子(CTGF)小分子干扰RNA(siRNA)对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMC)细胞外基质和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 根据siRNA靶序列要求及PRS反转录病毒载体特点分别设计4对寡核苷酸,构建表达人CTGF基因siRNA的PRS-CTGF-siRNA1～4重组反转录病毒载体.以脂质体2000将重组反转录病毒载体转染PT67包装细胞,继而感染HPMC.采用RT-PCR法检测mRNA表达及Western印迹法检测蛋白质表达.结果 5μg/L外源性转化生长因子β1(TGF-β1)刺激可诱导HPMC表达CTGF、纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col I)、层粘连蛋白(LN)和VEGF明显增高;而PRS-CTGF-siRNA 1～4组与TGF-β1刺激组比较,HPMC细胞内CTGF、FN、Col I、LN mRNA和蛋白表达和VEGF mRNA表达明显较低(P＜0.01),各干扰组对CTGF mRNA抑制率分别为69.3
作者：肖力；刘伏友；彭佑铭；段绍斌；刘虹；刘映红；凌光辉
来源：中华肾脏病杂志 2008 年 24卷 8期
