目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮间充质转化(EMT)的作用,及其与结缔组织生长因子(CTGF)、PI3K-Akt信号通路的关系.方法 (1)将体外培养的HK2细胞分为止常对照组、TGF-β1(5 μg/L,下同)组、VEGF组(100 μg/L,下同)、TGF-β1+VEGF组.HK2细胞体外培养48 h,用免疫组化双染方法检测肾小管上皮细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E钙黏蛋白的表达.(2)将体外培养的HK2细胞分为正常对照组、TGF-β1组、VEGF组、TGF-β1+VEGF组、PI3K-Akt信号通路阻断剂LY294002组(25 μmol/L,下同)、TGF-β1+LY294002组、VEGF+LY294002组、TGF-β1+VEGF+LY294002组.HK2细胞体外培养48 h,用Western印迹和RT-PCR方法检测α-SMA和CTGF的表达;用ELISA方法检测培养上清中纤连蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的表达.结果 免疫组化结果显示,TGF-β1组α-SMA表达比正常对照组增强,而E钙黏蛋白表达减弱;TGF-β1+VEGF组α-SMA表达比TGF-β1组显著减弱,而E钙黏蛋白表达增强.TGF-β1组α-SMA、CTGF蛋自和mRNA及FN、Col Ⅰ表达比正常对照组显著增强(均P<0.05);TGF-β1+VEGF组α-SMA、CTGF蛋白和mRNA及FN、Col Ⅰ表达比TGF-β1组显著减弱(均P<0.05);TGF-β1+VEGF+LY294002组α-SMA、CTGF蛋白和mRNA及FN、Col

作者：连耀国；何春梅；郑法雷

来源：中华肾脏病杂志 2009 年 25卷 6期