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目的 探讨转化生长因子β(TGF-β)Ⅰ型受体(R Ⅰ)、Ⅱ型(RⅡ)受体以及下游Smad蛋白在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏中表达及意义.方法 90只雌性Wistar 大鼠随机分为正常对照组(CON组)、假手术组(SOR组)和单侧输尿管梗阻组(UUO组),分别于术后1、3、7、14、21 d处死,检测各组大鼠肾功能;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态改变;实时定量PCR基因芯片分析正常大鼠和肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型受体及Smad蛋白家族表达.筛选出差异表达的受体亚型,进一步应用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测和验证筛选出的差异受体亚型在不同分期肾间质纤维化大鼠肾组织的分布和表达.结果 与CON组相比,UUO组大鼠的Scr及BUN于术后3d开始升高(P<0.05),第21天达峰值(P<0.01);UUO组术后3d肾间质可见明显炎性细胞浸润;14 d后出现明显肾小管萎缩;21 d可见明显肾间质纤维化.UUO组肾组织TGF-β Ⅰ型受体ALK-5、ALK-7和TGF-βRⅡ的mRNA表达于术后3d上升并随梗阻时间延长逐渐增加(P<0.05),于14 d达到峰值(均P<0.01);ALK-6的mRNA表达于术后3d下降(P<0.05)并随梗阻时间延长逐渐减少,于14 d达谷值(P<0.01).ALK-5、ALK-6、ALK-7和TGF-βRⅡ蛋白表达与基因表达一致.Smad2/3及磷酸化(p)-Sma

作者:沈楠;林洪丽;王伟东;谢华;孙艳玲;王大鹏;邢玮

来源:中华肾脏病杂志 2011 年 27卷 10期

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作者:
沈楠;林洪丽;王伟东;谢华;孙艳玲;王大鹏;邢玮
来源:
中华肾脏病杂志 2011 年 27卷 10期
标签:
受体,转化生长因子β Smad蛋白质类 输尿管梗阻 肾间质纤维化 Receptors,transforming growth factor-beta Smad proteins Ureteral obstruction Renal tubulointerstitial fibrosis
目的 探讨转化生长因子β(TGF-β)Ⅰ型受体(R Ⅰ)、Ⅱ型(RⅡ)受体以及下游Smad蛋白在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏中表达及意义.方法 90只雌性Wistar 大鼠随机分为正常对照组(CON组)、假手术组(SOR组)和单侧输尿管梗阻组(UUO组),分别于术后1、3、7、14、21 d处死,检测各组大鼠肾功能;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态改变;实时定量PCR基因芯片分析正常大鼠和肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-β Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型受体及Smad蛋白家族表达.筛选出差异表达的受体亚型,进一步应用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测和验证筛选出的差异受体亚型在不同分期肾间质纤维化大鼠肾组织的分布和表达.结果 与CON组相比,UUO组大鼠的Scr及BUN于术后3d开始升高(P<0.05),第21天达峰值(P<0.01);UUO组术后3d肾间质可见明显炎性细胞浸润;14 d后出现明显肾小管萎缩;21 d可见明显肾间质纤维化.UUO组肾组织TGF-β Ⅰ型受体ALK-5、ALK-7和TGF-βRⅡ的mRNA表达于术后3d上升并随梗阻时间延长逐渐增加(P<0.05),于14 d达到峰值(均P<0.01);ALK-6的mRNA表达于术后3d下降(P<0.05)并随梗阻时间延长逐渐减少,于14 d达谷值(P<0.01).ALK-5、ALK-6、ALK-7和TGF-βRⅡ蛋白表达与基因表达一致.Smad2/3及磷酸化(p)-Sma