目的 研究慢性肾衰竭大鼠血清对主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)泛素-蛋白酶体系统、激活转录因子4(ATF4)及组蛋白乙酰转移酶p300表达的影响,初步探讨慢性肾衰竭血清对主动脉VSMC作用的可能机制.方法 建立慢性肾衰竭大鼠模型,采集其血清;采用原代培养的大鼠主动脉VSMC,分正常组(正常大鼠血清刺激)和慢性肾衰竭血清组(慢性肾衰竭血清刺激).用不同大鼠血清刺激72 h后,分别采用实时定量PCR、Western印迹及特异底物反应法检测慢性肾衰竭血清对VSMC泛素、泛素激活酶(ubiquitin activating enzyme,简称E1)、β转导重复相容蛋白1(β-transducin repeat containing protein 1,β-TrCP1)、p300及ATF4mRNA表达,E1、β-TrCP1、p300及ATF4蛋白表达及蛋白酶体活性的影响.结果 (1)慢性肾衰竭血清使主动脉VSMC泛素、E1、β-TrCP1、p300及ATF4mRNA表达增加,与正常组相比,差异均有统计学意义(P< 0.01),随时间延长;慢性肾衰竭血清组泛素、E1、β-TrCP1、p300及ATF4 mRNA表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01).(2)慢性肾衰竭血清使主动脉VSMC E1、β-TrCP1、p300及ATF4蛋白表达增加,与正常组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);随时间延长,慢性肾衰竭血清组E1、β-TrCP1及p300蛋白表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01).ATF4
作者:张耀全;胡宏;姚霞娟;陈燕
来源:中华肾脏病杂志 2013 年 29卷 12期