目的 探讨前列腺素E2(PGE2)受体3亚型(EP3)对转化生长因子?β1(TGF?β1)诱导的小鼠肾小球系膜细胞的损伤及可能机制. 方法 体外培养原代野生型系膜细胞,采用脂质体LipofectamineTM 2000化学合成法将siRNA转染至系膜细胞中沉默EP3受体,筛选干扰效率最大的EP3?siRNA片段.实验分组:(1)正常对照组;(2)TGF?β1(10 μg/L)组;(3)NC?siRNA+TGF?β1(10μg/L)组;(4)EP3?siRNA组;(5)EP3?siRNA+TGF?β1(10μg/L)组.CCK?8法检测TGF?β1对细胞增殖的影响;ELISA法检测细胞PGE2和cAMP的表达;实时荧光定量PCR法检测纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)、环氧化酶2(COX2)、膜结合型前列腺素E2合酶1(mPGES1)mRNA的表达;Western印迹检测FN、CTGF、COX2、mPGES1蛋白表达及ERK1/2、p38 MAPK活性的变化. 结果 与正常对照组相比,TGF?β1组系膜细胞增殖明显增加(P<0.05),PGE2和cAMP表达增加(均P<0.05),FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均上调(均P<0.05);与TGF?β1组相比,EP3?siRNA+TGF?β1组系膜细胞增殖减少(P<0.05),FN、CTGF、COX2、mPGES1的mRNA和蛋白的表达均下调(均P<0.05).与正常组比较,TGF?β1组ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平明显增强(均P<0.05);而EP3?siRNA+TGF?β1组的ERK1/2、p38 MAPK磷酸化水平较TGF?β1

作者：马雯；陈晓岚；徐玉音；陆飞；范亚平

来源：中华肾脏病杂志 2015 年 31卷 9期