目的 观察高糖对骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)激活的影响,并探讨转化生长因子β激活激酶1(TGF-β activated kinase-1,TAK1)信号通路在其中的作用机制.方法 分离获取小鼠BMDM,运用流式细胞术鉴定BMDM细胞纯度.高糖作为刺激因素,TAK1特异性抑制剂5Z-7-oxozeaenol作为干预因素,分别设正常对照组(1640培养基)、渗透浓度对照组(25 mmol/L甘露醇)、高糖组(33 mmol/L葡萄糖)和高糖+抑制剂组(33 mmol/L葡萄糖+300 nmol/L 5Z-7-oxozeaenol).采用细胞免疫荧光和流式细胞术检测BMDM M1表型,实时定量PCR检测各组细胞单核细胞趋化因子1(MCP-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA水平,Western印迹法检测各组磷酸化(p)-TAK1、TAK1结合蛋白(TAK1binding protein,TAB1)、p-JNK、p-p38 MAPK和NF-κB p65蛋白的表达.结果 BMDM诱导分化成功,其纯度达99.36%.10~ 300 nmol/L 5Z-7-oxozeaenol对高糖环境中BMDM细胞活性无影响(均P> 0.05).与正常对照组比较,高糖组M1型巨噬细胞增加,MCP-1、TNF-α mRNA水平均上调(均P< 0.01),p-TAK1、TAB1、p-JNK、p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达也显著升高(均P< 0.05);TAK1特异性抑制剂5Z-7-oxozeaenol作用均能抑制高糖诱导产生的效应(均P<0.05).结论 高糖能诱导BM
作者:冯世尧;徐兴欣;邵云侠;李媛媛;付欣;吴永贵
来源:中华肾脏病杂志 2016 年 32卷 1期