目的 探讨环孢菌素A(CsA)对肾小管上皮细胞(TEC)自噬-溶酶体通路的影响.方法 不同浓度(3、5、10 μmol/L)CsA刺激人近端肾小管上皮(HK-2)细胞24h.用MTT法检测细胞活力;AnnexinV-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光法检测细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ和p62表达;共聚焦显微镜下观察mRFP-GFP串联荧光标记LC3(tfLC3)质粒转染HK-2细胞后自噬体与溶酶体融合及降解情况;用流式细胞术检测HK-2细胞溶酶体对DQ-卵清蛋白的消化能力.结果 与对照组相比,5、10 μmol/L CsA组细胞活力下降(均P＜ 0.01);细胞凋亡数增多(均P＜0.05).与对照组相比,3、5、10 μmol/L CsA组细胞LC3-Ⅱ和p62表达增加(均P＜0.05);自噬体降解受阻;细胞溶酶体消化DQ-卵清蛋白能力下降(均P＜ 0.01).结论 CsA通过损害溶酶体功能而阻滞肾小管上皮细胞自噬通路,可能是CsA肾病的发生机制之一.
作者：安宁；李志航；杨陈；潘庆军；刘华锋
来源：中华肾脏病杂志 2017 年 33卷 4期
