目的 探讨羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)在β-甘油磷酸钠(β-GP)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)钙化过程中的作用及其机制.方法 VSMC用10％胎牛血清+1％双抗高糖DMEM培养液,于37℃、5％CO2培养箱中培养,根据细胞生长密度按1:4比例传代.实验分为3组:对照组(NC)、高磷诱导钙化组(HP)、HSYA干预组(HSYA).用茜素红染色和钙测定试剂盒(邻甲酚酞络合酮比色法)检测各组细胞钙沉积量;Western印迹法检测细胞钙化指标碱性磷酸酶(ALP),Runt相关转录因子2(RUNX2),核因子κB受体活化因子配体(RANKL),α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),及TLR4/NF-κB通路和炎性反应相关指标Toll样受体4(TLR4),白细胞介素8(IL-8),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化.抽提细胞核蛋白和细胞质蛋白,Western印迹法检测细胞核NF-κB p65和细胞质p65,及细胞总蛋白中p65和磷酸化p65的改变.超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒法检测细胞抗氧化酶和氧化终产物的改变.结果 Western印迹结果显示,HSYA组细胞钙化指标ALP、RUNX2、RANKL的表达量较HP组明显减少;α-SMA表达较HP组增加(均P<0.01).HSYA组TLR4、TNF-α、IL-8和p-p65/p65的表达量较HP组减少,p65入核减少,细胞质内p65的表达增多(均P<0.05).HSYA组细胞SOD含量较HP组明显升高,MDA含量较H

作者：韩怡然；徐天华；邱小波；盛子桐；万鹏志；李悦；姚丽

来源：中华肾脏病杂志 2019 年 35卷 11期