目的：观察胰岛素基因突变所致的青少年型糖尿病（MIDY）其突变型胰岛素原对非折叠蛋白反应（UPR）信号通路的影响，探讨错误折叠的胰岛素原导致内质网应激（ESR）、β细胞功能衰竭的分子机制。方法用含有小鼠野生型胰岛素原（正常对照组）和3种突变型胰岛素原cDNA的重组质粒C（A7）Y、G（B8）S、G（C28）R分别转染293T细胞，转染72 h后收集细胞分为两组，一组细胞提取总RNA，采用SQRT-PCR法检测剪切型和非剪切型X-盒结合蛋白（XBP-1）mRNA的表达。另一组细胞提取蛋白，采用Western blotting技术检测细胞中真核细胞转录起始因子α（eIF2α）和磷酸化eIF2α（p-eIF2α）的蛋白表达。采用单因素方差分析及t检验进行统计学分析。结果与正常对照组相比，C （A7）Y组和G（B8）S组剪切型/非剪切型XBP-1 mRNA比值均升高，差异均有统计学意义[C（A7）Y组（0.84±0.17），G（B8）S组（0.70±0.16），与正常对照组（0.52±0.16）相比，t=3.17、2.35，均P<0.01]；G （C28）R组与正常对照组相比差异无统计学意义[G（C28）R组（0.55±0.14），t=0.30，P>0.05]。计算各组p-eIF2α/eIF2α比值，C（A7）Y组和G（B8）S组与正常对照组相比均升高，差异均有统计学意义[正常对照组（0.10±0.01）,C（A7）Y组（0.35±0.03）,G
作者：孙楠；崔景秋；宋向欣；哈尼克孜；冯凭
来源：中华糖尿病杂志 2015 年 2期
