目的:探讨棕榈酸(PA)是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法:将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组(1.0 mmol/L)、PA+凋亡抑制剂(Z-VAD-FMK)组(5 μmol/L)、PA+铁死亡抑制剂(Fer-1)组(5 μmol/L)、PA+坏死抑制剂(Nec-1)组(5 μmol/L),每组设置3个平行组。采用CCK8法检测细胞存活率,电镜观察细胞超微结构改变,FerroOrange试剂盒检测细胞内Fe
2+水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA水平,流式法检测活性氧(ROS)水平,实时荧光定量PCR法检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3(
caspase3)、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3(
RIPK3)、铁死亡相关基因长链脂酰辅酶A合成酶4(
ACSL4)、花生四烯酸-15-脂加氧酶(
ALOX15)、前列腺素内过氧化物合酶2(
Ptgs2)、铁蛋白重链(
FTH)、铁蛋白轻链(
FTL)和谷胱甘肽过氧化物酶4(
GPX4)的mRNA表达水平,Western blotting法检测活化型caspase3(cleaved caspase3)、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白表达水平。两组间比较采用
t检验。
结果:与PA组相比,PA+Z-VAD-FMK组、PA+Fer-1组和PA+Nec-1组MIN6的存活率均更高(
P<0.01)。PA组MIN6细胞
作者:秦璐;黄逸婷;李雨潇;秦瑶;石毓雯;许馨予;陈恒;张梅
来源:中华糖尿病杂志 2022 年 14卷 5期