目的:探讨叉头状转录因子O3(FOXO3)在小鼠肝脏糖代谢中的作用。方法:将雄性肝脏激活蛋白(LAP)启动子控制下且表达四环素调节的反式激活因子(tTA)的转基因小鼠(LAP-tTA小鼠)与雌性荧光素酶-tet操作元件(tetO)7-FOXO3的组成型活性等位基因小鼠[(tetO)7.FOXO3CA小鼠]杂交,获得FOXO3CA
hep小鼠(tTA
+/FOXO3CA
+,肝脏FOXO3条件性高表达,7只)。以tTA
-和(或)FOXO3CA
-小鼠作为对照组(9只)。通过IVIS活体成像、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blotting以及免疫组化检测各组小鼠肝脏FOXO3表达情况,RT-qPCR检测相关糖异生基因[葡萄糖6-磷酸酶(
G6pc)、磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(
Pepck)、丙酮酸脱氢酶激酶4(
Pdk4)]的mRNA水平。监测小鼠血糖、血清胰岛素,并进行葡萄糖耐量实验以及胰岛素耐量实验。利用免疫组织化学染色评估胰腺胰岛增生、胰岛素以及胰高血糖素表达。组间比较采用
t检验。
结果:IVIS活体成像、RT-qPCR、Western blotting以及免疫组化证实FOXO3CA
hep小鼠肝脏FOXO3高表达,且主要表达于肝细胞核内,FOXO3高表达导致肝细胞体积明显小于对照组肝细胞。与对照组相比,7周龄FOXO3CA
作者:李栋;贺佳佳;邢月仙;孙子林
来源:中华糖尿病杂志 2023 年 15卷 12期