目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF- 1α)在早产儿视网膜病发病中的作用,为其基因治疗寻找新的靶点.方法 将化学合成的小分子干扰RNA( smallinterference RNA,siRNA)用脂质体介导法转染大鼠视网膜血管内皮细胞,转染的细胞在含化学缺氧剂——二氯化钴的培养基中培养.培养8h后,应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应和Western印迹技术检测转染后细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达量.培养24 h后应用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法检测细胞的增殖活性.采用两独立样本t检验比较各转染组与阴性对照组之间的差异.结果 成功将siRNA转染至大鼠视网膜血管内皮细胞,荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术检测显示,针对靶基因HIF-1α设计的4条平行干扰序列siRNA均能不同程度抑制HIF-1α的转录表达,siRNA1、siRNA2和siRNA4组HIF-1α mRNA的相对表达水平分别为0.1620±0.0147、0.2034±0.0251和0.3049±0.0165,分别降至空白对照组(1.0000±0.0344)的16.20％、20.34％和30.49％,与阴性对照组(0.8334±0.0242)之间差异有统计学意义(t分别为16.786、8.953和4.087,P均＜0.05).Western印迹技术显示,siRNA1和siRNA2转染的大鼠视网膜血管内皮细胞HIF-1α蛋白表达水平分别为0.4956±0.0421和0.65

作者：杨晓光；张文辉；黄晓艳；杨舒广；谢小强；叶贞志；白青青；周晓光

来源：中华围产医学杂志 2012 年 15卷 6期