目的 探讨脑胶质瘤相关癌基因-1(Gli1)在胰腺癌细胞侵袭和迁移中的作用及可能机制.方法 体外培养胰腺癌细胞株Capan-2,通过RNA干扰技术分别干扰Capan-2细胞中的Gli1、小鼠双微体基因2(MDM2)和p53基因的表达.应用实时定量(qRT)-PCR试验进行干扰效应的验证;通过细胞侵袭和迁移实验观察干扰Capan-2细胞中Gli1、MDM2和p53表达对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响.同时通过Western blot法检测干扰Gli1表达后,金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(pERK)及磷酸化蛋白激酶B(pAKT)在Capan-2细胞中表达的变化.采用配对t检验对实验数据进行统计学分析.结果 qRT-PCR试验结果显示,干扰Gli1、MDM2、p53表达后,其mRNA水平较仅加脂质体组和对照组相比分别下调了70.5%和74.5%、61.8%和65.3%、73.8%和78.2%.在p53野生型Capan-2细胞中,干扰Gli1表达后胰腺癌细胞侵袭(94±8)和迁移能力(143±8)较对照组(150 ±7,190±10)均明显减弱(=6.584,P=0.022;t=8.266,P=0.014);干扰MDM2表达亦降低了细胞的侵袭(实验组:85±12,对照组:138 ±6)和迁移能力(实验组:127 ±9,对照组:180±10)(t=5.097,P=0.036;t =4.860,P=0.040).然而,体外干扰p53基因表达后,Capan-2细胞的侵袭(153 ±11)和迁移能力(209±13)较干扰前(106
作者:盛伟伟;董明;周建平;柳青峰;李新;董齐
来源:中华外科杂志 2014 年 52卷 7期