应用末端脱氧核苷酸转移酶,以寡聚(dC)或(dG)接尾于3′-OH末端凸出的或隐蔽的双链DNA。在所用的条件下已将约20~30个dG加于pstI酶切之pBR322DNA的3′末端,和20~30个dC加于Eco-RI酶切之HBV基因组的3′末端,通过退火将接尾的DNA已成功地构建了重组质粒,转化至大肠杆菌RR1,转化子通过原位杂交(应用[α
32P]dATP标记的HBV探针)和电泳测定其大小,共筛选出40个阳性克隆。对40个克隆的细胞提取液采用固相放射免疫和反向间接血凝试验检测了HBsAg,其中仅一个克隆检测出存在HBsAg,另一个存在HBcAg,但反应是微弱的和不稳定的。
作者:马清钧;周建光;刘传暄;于秀琴;苏国富;黄翠芬
来源: 1984 年 04卷 3期