目的 构建和表达抗胃癌鼠单抗3H11的Fab段小分子抗体.方法 采用RT-PCR方法,利用第一骨架区通用引物扩增重链Fd段和κ链的基因,克隆到Fab表达载体中.并根据已克隆的3H11 VL的真实序列,重新设计κ链5'端引物,将骨架区引物在κ链5'端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列,再次构建Fab表达载体.结果 利用第一骨架区通用引物构建的Fab在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性,将骨架区引物在κ链5'端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列后,在大肠杆菌中表达出了可与抗原MGC803细胞结合的Fab段.结论 在构建小分子抗体时,PCR引物引入的氨基酸残基的改变可影响所表达抗体的活性.
作者：李竞；王琰；王卓智；董志伟
来源：中华微生物学和免疫学杂志 1999 年 19卷 2期
