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目的筛选活化人免疫细胞的CpG基序(CpG motif),设计对人免疫细胞有强免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN). 方法设计合成含有5′-CG-3′二核苷酸、长度为12个碱基的硫代修饰CpG-ODN,并利用体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC),以培养上清中的IgM水平为指标,筛选能够活化人免疫细胞的CpG基序.根据筛选获得的活性CpG基序,设计一组含有2~6拷贝CpG基序、长度为15~30个碱基的CpG-ODN,从中筛选对人免疫细胞有强免疫刺激活性的序列. 结果发现了多个活性CpG基序,其中5′-GACGTT-3′,5′-GACGTC-3′,5′-GGCGTT-3′和5′-GGCGTC-3′等4个基序对人B细胞有中度免疫刺激活性,和已发表的小鼠CpG基序完全一致;5′-GTCGTT-3′和5′-GTCGTC-3′ 2个基序对人B细胞有高度免疫刺激活性,第二位碱基均为“T”,而在小鼠CpG基序中该位碱基为“G”或“A”.根据后2个CpG基序,设计了多个对人免疫细胞有高度免疫刺激活性的CpG-ODN. 结论人免疫细胞中存在有高度免疫刺激活性的CpG基序和CpG-ODN.

作者:许洪林;王四清;王世峰;郭斐;陆柔剑;阮力

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2001 年 21卷 5期

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许洪林;王四清;王世峰;郭斐;陆柔剑;阮力
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2001 年 21卷 5期
标签:
CpG基序 CpG寡脱氧核苷酸 免疫细胞
目的筛选活化人免疫细胞的CpG基序(CpG motif),设计对人免疫细胞有强免疫刺激活性的CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN). 方法设计合成含有5′-CG-3′二核苷酸、长度为12个碱基的硫代修饰CpG-ODN,并利用体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC),以培养上清中的IgM水平为指标,筛选能够活化人免疫细胞的CpG基序.根据筛选获得的活性CpG基序,设计一组含有2~6拷贝CpG基序、长度为15~30个碱基的CpG-ODN,从中筛选对人免疫细胞有强免疫刺激活性的序列. 结果发现了多个活性CpG基序,其中5′-GACGTT-3′,5′-GACGTC-3′,5′-GGCGTT-3′和5′-GGCGTC-3′等4个基序对人B细胞有中度免疫刺激活性,和已发表的小鼠CpG基序完全一致;5′-GTCGTT-3′和5′-GTCGTC-3′ 2个基序对人B细胞有高度免疫刺激活性,第二位碱基均为“T”,而在小鼠CpG基序中该位碱基为“G”或“A”.根据后2个CpG基序,设计了多个对人免疫细胞有高度免疫刺激活性的CpG-ODN. 结论人免疫细胞中存在有高度免疫刺激活性的CpG基序和CpG-ODN.