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目的构建H.pylori ureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株,并进行初步的免疫原性分析. 方法将H.pylori ureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A-asd质粒的多克隆位点之内.挑取单菌落质粒鉴定后,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4072,SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达.将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB/c小鼠. 结果疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量(Mr)为64×103的UreB蛋白及77×103的UreB-HspA融合蛋白.在免疫BALB/c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H.pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体. 结论构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB-HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株,为探索制备H.pylori口服活菌疫苗奠定了基础.

作者:李勣;刘纯杰;李淑琴;陶好霞;刘秀丽;张兆山

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2003 年 23卷 7期

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作者:
李勣;刘纯杰;李淑琴;陶好霞;刘秀丽;张兆山
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2003 年 23卷 7期
标签:
幽门螺杆菌 尿素酶B 热休克蛋白A 鼠伤寒沙门菌 疫苗
目的构建H.pylori ureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株,并进行初步的免疫原性分析. 方法将H.pylori ureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A-asd质粒的多克隆位点之内.挑取单菌落质粒鉴定后,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4072,SDS-PAGE和Western blot检测蛋白表达.将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB/c小鼠. 结果疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量(Mr)为64×103的UreB蛋白及77×103的UreB-HspA融合蛋白.在免疫BALB/c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H.pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体. 结论构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB-HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株,为探索制备H.pylori口服活菌疫苗奠定了基础.